根據(jù)臨床實驗室認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，性能驗證的所有工作需要由實驗室人員完成，在特殊情況下，可以請求技術(shù)支持人員的幫助；操作人員熟悉檢驗方法，確保儀器在良好的運行狀態(tài)，使用同批號的試劑和對應(yīng)校準(zhǔn)品；最好采用病人新鮮標(biāo)本避免基質(zhì)效應(yīng)，同時盡可能避免溶血、黃疸等干擾存在；驗證線性和方法學(xué)比較時，使用樣本的線性范圍盡可能處于廠家聲明內(nèi)，濃度與醫(yī)學(xué)決定值相當(dāng)，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

任何嚴(yán)重影響檢驗程序分析性能的情況發(fā)生后，應(yīng)在檢驗程序重新啟用前對受影響的性能進(jìn)行驗證。影響檢驗程序分析性能的情況包括但不限于：儀器主要部件故障、儀器搬遷、設(shè)施 (如純水系統(tǒng)) 和環(huán)境的嚴(yán)重失控等。
常規(guī)使用期間，實驗室可基于檢驗程序的穩(wěn)定性，利用日常工作產(chǎn)生的檢驗和質(zhì)控數(shù)據(jù)，定期對檢驗程序的分析性能進(jìn)行評審，應(yīng)能滿足檢驗結(jié)果預(yù)期用途的要求。現(xiàn)用檢驗程序的任一要素 (儀器、試劑、校準(zhǔn)品等) 變更，如試劑升級、儀器更新、校準(zhǔn)品溯源性改變等，應(yīng)重新進(jìn)行驗證。

性能驗證一般一年1—2次，并且根據(jù)需要每一次性能驗證的項目是不一定相同，如裝機(jī)時的性能驗證項目較多，平時（試劑升級、儀器校準(zhǔn)后、更換重要部件等）的性能驗證項目會根據(jù)具體原因進(jìn)行調(diào)整。

臨床化學(xué)定量檢驗程序的分析性能參數(shù)一般包括：測量正確度、測量精密度 (含測量重復(fù)性和測量中間精密度)、測量不確定度、分析特異性 (含干擾物)、分析靈敏度、檢出限和定量限、線性區(qū)間 (可報告區(qū)間)、參考區(qū)間等（CNAS-GL037）。

臨床免疫學(xué)定性檢驗程序的分析性能參數(shù)一般包括：符合率、精密度 (重復(fù)性)、檢出限、臨界值、抗干擾能力、血清與血漿結(jié)果一致性等（CNAS-GL038）。

實驗室應(yīng)根據(jù)不同檢驗項目的預(yù)期用途選擇對檢驗結(jié)果質(zhì)量有重要影響的參數(shù)進(jìn)行驗證。

定量檢驗性能驗證的內(nèi)容較多，根據(jù)ISO15189的要求，本文重點討論定量檢驗的關(guān)鍵性能：精密度、正確度以及可報告范圍。

驗證材料及要求：可以使用新鮮或冷凍保存的樣本，考慮到穩(wěn)定性及易得性可以使用無基質(zhì)效應(yīng)的質(zhì)控品，每個項目需至少評價兩個濃度水平驗證材料的精密度，且包含該項目的醫(yī)學(xué)決定水平。

試劑和校準(zhǔn)品的要求：使用同一批次的試劑，不可多次校準(zhǔn)。

?批內(nèi)精密度

分別計算每一批的均值，批內(nèi)方差Sdruni2(Sdrun12,Sdrun22…… Sdrun52)，再計算重復(fù)精密度Sr，也就是批內(nèi)精密度，與廠家的聲稱值進(jìn)行比較，小于聲稱值即通過驗證，大于聲稱值應(yīng)與廠家聯(lián)系并取得幫助。

?批間精密度

需要計算總均值，批間方差Sb2，以及批間標(biāo)準(zhǔn)差SI，注意期間標(biāo)準(zhǔn)差是包括批內(nèi)與批間標(biāo)準(zhǔn)差的。得到的計算值與廠家聲稱的標(biāo)準(zhǔn)差相比較，如果廠家給的是變異系數(shù)（CV），要與廠家測量結(jié)果的總均值相乘換算為標(biāo)準(zhǔn)差。通過標(biāo)準(zhǔn)差來比較，如果小于廠家聲稱標(biāo)準(zhǔn)差，驗證通過。如果大于聲稱值應(yīng)與廠家聯(lián)系并取得幫助。

正確度驗證方案：實驗室可以根據(jù)實際情況采用評估偏倚、回收試驗和參考方法比較的方式進(jìn)行驗證，或參加能力驗證、進(jìn)行比對試驗證明檢測結(jié)果與使用相同方法的其他實驗室結(jié)果的一致性。

?評估偏倚

選擇至少兩個濃度的實驗室可得范圍內(nèi)最優(yōu)且有互換性的標(biāo)準(zhǔn)物；連續(xù)檢測五天，每個濃度至少每天重復(fù)檢測兩次，計算所有結(jié)果的均值，減去參考值即為偏倚。 

?回收試驗    

臨床標(biāo)本作為基礎(chǔ)標(biāo)本，將小于總體積10%的標(biāo)準(zhǔn)溶液加入其中制成不同種濃度在測量范圍內(nèi)的待測樣品，每個待測樣本重復(fù)檢測三次，計算均值。

回收率=（待測樣品濃度計算均值*總體積-基礎(chǔ)樣品濃度*基礎(chǔ)樣品體積）/（加入體積*加入標(biāo)準(zhǔn)品濃度）。  

?與參考方法比較

標(biāo)本選擇：8個以上在測量范圍均勻分布包含醫(yī)學(xué)決定水平濃度的樣本，選擇 CNAS 認(rèn)可實驗室使用的參考方法。

檢測及計算：同時使用兩種方法對同一標(biāo)本完成三次以上檢測，計算均值和偏倚。

?參加衛(wèi)生部、臨床檢驗中心室間質(zhì)評/能力驗證

回報結(jié)果如圖：

?樣本室間比對

比對實驗室選擇：使用同一檢測方法、具有良好室內(nèi)質(zhì)量控制室間質(zhì)評合格、通過認(rèn)可的實驗室。

標(biāo)本要求：含有醫(yī)學(xué)決定水平濃度且涵蓋正常值至異常值范圍的20份以上臨床樣本。

頻率：至少每年2次。

判斷標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)有≥80%結(jié)果符合要求。

要注意驗證的是線性范圍，什么是線性范圍？課本上的定義先復(fù)習(xí)一遍，指對沒有進(jìn)行任何預(yù)處理（稀釋，濃縮等）的標(biāo)本，分析方法能夠直接測定出的待測物范圍，也就是系統(tǒng)最終的輸出值（活性或濃度）與被分析物的活性或濃度成線性比例的范圍。是直接可以測定出的濃度范圍，不是臨床可報告范圍哦。

需要準(zhǔn)備高（H）低（L）兩個濃度的樣本，按照H:L為0：4，3：1，2：2，1：3，4：0的比例，得到5份樣本，在一個批次內(nèi)測定完畢，每份樣本至少測定2次。

記錄所有測定結(jié)果，室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)在控，認(rèn)為結(jié)果有效。以理論值為橫坐標(biāo)，測量均值為縱坐標(biāo)做直線回歸圖。求出線性方程和相關(guān)系數(shù)的平方r2（Excel表格輕松解決）。如果r2＞0.995，則在這個濃度范圍內(nèi)的驗證通過。如驗證未通過可增加樣本量及重復(fù)測量次數(shù)，如仍未通過應(yīng)與廠家聯(lián)系并取得幫助。注意測量中如果有攜帶污染，應(yīng)根據(jù)實際情況采取恰當(dāng)措施（如應(yīng)用空白隔開樣本）盡量避免對測定結(jié)果的影響。

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